Txerri Zirkobirus Mota-Ⅱ Antigorputz ELISA detektatzeko Kita txerriaren seruman in vitro PCV antigorputz espezifikoa zehazteko da. Testa txerri-haztegietako -Ⅱ txerri zirkubirus motako txertoarekin txertatutako txertoa ebaluatzeko erabiltzen da.
Alea:seruma
Emandako materialak:
Prozedurak eta interpretazioa
1. URRATSA Prozedura
1.1 Garbitu disoluzioa prestatzea
Lan-kontzentrazioa garbitzeko likidoa: Erabili aurretik, garbiketa-soluzioa giro-tenperaturara (20-25 gradu) berreskuratu eta uniformeki astindu behar da uniformea izan dadin. Ondoren, 20 aldiz diluitu garbiketa kontzentratua ur araztuarekin (adibidez, 5 ml garbiketa kontzentratua gehitzen zaio 95 ml ur araztuari), ondo nahastu eta diluitutako garbiketa-likidoa 2-8 gradutan gorde daiteke 7 egunez.
1.2 Laginak prestatzea
① Animalien odol osoa hartu, 4000 rpm-an zentrifugatu zen 10 minutuz eta gainnadantea bildu zen. Seruma ere modu naturalean koagula daiteke hemolisirik gabe.
② Diluitu serum lagina 1:25 (gehitu 5ul serum lagina 120ul lagin diluitzaileari) eta ondo nahastu.
Oharra: Kontrol negatiboak eta positiboak ez dira diluitu behar.
1.3 Entzima konjokatua Prestaketa
Diluitu entzima konjokatua 1:25 (gehitu 5ul entzima konjokatua 120ul entzima diluitzaileari) eta ondo nahastu.
1.4 Prozeduraren prozedura
①Hartu entzimaren etiketa Microplate (lagin kopuruaren arabera, hainbat aldiz desmuntatu eta erabil daiteke), gehitu diluitutako serumaren 100ul Microplate entzimaren etiketari, ezarri bi putzu bakoitza lagin negatiboetarako eta positiboetarako, eta gehitu 100ul bakoitzeko kontrol negatiboetarako eta positiboetarako erreakzio-putzuan hurrenez hurren. Poliki-poliki astindu lagina putzuan, zigilatzeko plaka filma erabiliz plaka estaltzeko, eta inkubatu 37 gradutan 30 minutuz.
②Ireki zigilatzeko plaka filma, astindu ondo plakako disoluzioa, gehitu 300µl lan-kontzentrazioko garbiketa-likidoa putzu bakoitzean eta, ondoren, bota likidoa putzuan. Errepikatu goiko urratsak 5 aldiz, eta, azkenik, lehortu paper xurgatzaile garbi batean.
④Ireki zigilatzeko plaka filma, astindu ondo plakako disoluzioa, gehitu 300µl lan-kontzentrazioko garbiketa-likidoa putzu bakoitzean eta, ondoren, bota likidoa putzuan. Errepikatu goiko urratsak 5 aldiz, eta, azkenik, lehortu paper xurgatzaile garbi batean.
⑥Gehitu 50µl stop-soluzioa putzu bakoitzean, eta zehaztu emaitza 5 minuturen buruan.
2. URRATSA Emaitzen interpretazioa
Putzu bakoitzaren OD450 balioa 96 putzuko mikroplaken irakurgailuan irakurri zen.
2.1 Balioztatzea
Kontrol negatiboaren batez besteko OD450nm balioa izan zen<0.1 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥5, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.
2.2 Kalkulu metodoa
Lagin bakoitzerako, kalkulatu S/P honela lagin eta kontrol-balio zuzenduak erabiliz:
S/P=(ODLAGIN-ODNC) / (ODPCa-ODNC)
2.3 Emaitzen interpretazioa
Noiz S/P<0.15, it is judged as negative.
S/P 0,25 baino handiagoa edo berdina denean, positibotzat jotzen da.
0,15 S/P baino txikiagoa edo berdina denean<0.25, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.
Hot tags: txerri zirkubirus mota -ⅱ antigorputz elisa detektatzeko kit, Txinako txerri zirkubirus mota-ⅱ antigorputz elisa detektatzeko kit hornitzaileak, fabrikatzaileak, fabrika
